蛋白純化系統(tǒng)日常維護(hù)那些事
近日，“老祖宗的教誨”系列火出了圈，早先傳統(tǒng)文化里輸出的淺顯易懂且實用的道理，多少年鮮有人留意和傾聽。而今，借助AI技術(shù)“復(fù)活”老祖宗來重新復(fù)述和講解，聽上去確實有***番道理，有種溫故而知新的感覺。
儀器維護(hù)之道，亦如先賢智慧，貴在知行合***。實驗室小伙伴們是不是通常會忽略***些簡單卻關(guān)鍵的注意事項？縱使使用手冊事無巨細(xì)，若使用者未給予足夠重視，或交接時疏于詳盡溝通，久而久之，儀器的損耗便如暗流積聚，終有***日徹底“抱恙”——實驗停滯、項目受阻，更需承擔(dān)高昂的維修代價，屆時追悔莫及。
這里就以英賽斯公司AutoPure蛋白純化系統(tǒng)為例，簡要敘述儀器的日常維護(hù)和啟停注意事項（其它品牌蛋白純化系統(tǒng)亦可借鑒），愿諸君防患于未然，使儀器歷久彌新。
01 日常維護(hù) 每天 整機(jī)流路部分 ◇ 清潔擦拭外表，防止溶液結(jié)晶鹽腐蝕設(shè)備外表面以及元器件； （Ps:***些嚴(yán)重的儀器外觀腐蝕生銹，往往從日常濺液滯留開始的。) ◇ 溶液和樣品需過膜，推薦使用孔徑0.45μm或相當(dāng)?shù)臑V膜過濾，此操作可有效防止流路堵塞、層析柱填料及檢測器臟污損壞。 ◇ 檢查系統(tǒng)管路和接頭是否存在破損，特別注意Peek管是否有壓折（內(nèi)徑大的peek管更易彎折，如1mm白管）；防止?jié)B漏，超壓，樣品損失，層析柱損壞。 ◇ 系統(tǒng)使用完畢后，需用純水將系統(tǒng)沖洗干凈至各基線平穩(wěn)，隨后使用20%乙醇清洗系并保存所有流路，防止流路長菌及性能下降。在使用含鹽緩沖液和20%乙醇保存液中間需間隔純水的沖洗，防止混合產(chǎn)生的微氣泡滯留系統(tǒng)。 pH計 ◇ 使用前校正pH計（***定要先校正接近7的點） ◇ 使用后將pH計拆下，使用純水沖洗并擦拭干凈，浸入保護(hù)液（pH4.0飽和KCl溶液）保存 ◇ pH 電極前端由***個薄玻璃膜組成，避免磕碰、污染或干燥，否則會導(dǎo)致電極損壞。 系統(tǒng)泵 ◇ 每次使用前或更換緩沖液時，需從排空閥排出泵腔和管路里殘留的氣泡（使用大注射器緩慢抽出至少5ml液體），否則會影響流速的準(zhǔn)確性，甚至導(dǎo)致泵無法正常出液。 每周 整機(jī)流路部分 ◇ 緩沖液入口濾網(wǎng)的檢查和清潔，如果臟污較明顯，可拆下濾網(wǎng)進(jìn)行超聲清洗。 ◇ 檢查泵后潤洗液，確認(rèn)是否存在顯著增加或減少，同時觀察是否渾濁，如有異常，需更換潤洗試劑（20%乙醇），并重新做好液位標(biāo)記。 每月 整機(jī)部分 ◇ 使用1M NaOH溶液，AB泵各50%，以系統(tǒng)***大流速的10%沖洗約20分鐘，隨后立即用純水將NaOH沖洗干凈（電導(dǎo)值趨向于0）。 ◇ 使用75%乙醇溶液，AB泵各50%，以系統(tǒng)***大流速的10%沖洗約2分鐘，隨后用純水將乙醇溶液沖洗干凈。 ◇ 在線濾膜拆卸后用0.5M NaOH超聲清洗10分鐘。 背壓閥 ◇ 通過在線/拆除對比的方式，檢查背壓閥壓力參數(shù)（5ml/min流速下0.14MPa±0.05MPa），如有高于設(shè)置值情況，可超聲清洗、調(diào)節(jié)或者更換。如有疑問，建議咨詢當(dāng)?shù)厥酆蠊こ處煛?/span> 每半年 壓力檢測器 ◇ 零點檢查：斷開壓力傳感器前端及后端接頭，檢查顯示的壓力數(shù)值，如果不在零點且誤差超過±0.02MPa，聯(lián)系售后工程師進(jìn)行上門校準(zhǔn)。 紫外檢測器 ◇使用注射器將10%的表面活性劑（如Decon90 , SDS等）注入紫外流動池，來回抽吸若干次，停留20分鐘后，用純水沖洗干凈。 ◇使用注射器注入乙醇或1M NaOH注入紫外流動池，來回抽吸若干次，停留20分鐘后，用純水沖洗。 pH/電導(dǎo)檢測器 ◇清洗流通池：拆下pH電極，安裝盲堵，用1M NaOH清洗pH流通池30分鐘，然后用純水沖洗。 ◇清洗pH電極（響應(yīng)慢，頻發(fā)不準(zhǔn)確時)： 1.鹽沉積：0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl交替洗數(shù)次，間隔5分鐘，中間使用水清洗電極； 2.油脂沉積：1%SDS清洗后進(jìn)行水洗； 3.蛋白沉積：1%蛋白酶于0.1M HCl 溶液中清洗后進(jìn)行水洗。 預(yù)防性保養(yǎng) ? 對整個系統(tǒng)做***次全面細(xì)致的維護(hù) ? 降
